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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
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生物发光法测定天然水体细菌数量中游离atp的去除
DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.03004, PP. 1091-1095
Keywords: atp生物发光法,tritonx-100,apyrase,体细胞atp,游离atp
Abstract:
天然水体中存在浮游动植物等体细胞和游离atp，会对细菌atp的测定产生严重的干扰，所以探究体细胞和游离atp的消除方法是生物发光法测定细菌总数中不可缺少的预处理步骤.本文研究了体细胞提取剂tritonx-100的最适浓度和最适提取时间，游离atp水解酶apyrase的最适浓度和对细菌atp测定的影响，并将包含tritonx-100和apyrase酶的体细胞排除体系应用于实际天然水体细菌数量的测定.结果显示，0.4%的tritonx-100作用水样2min能够有效提取水样中的体细胞；apyrase酶浓度达到0.2u时能够有效水解水样中的游离atp；apyrase酶的加入对细菌无水解作用，对细菌atp的测定无明显影响；包含tritonx-100和apyrase酶的体细胞排除体系能够裂解体细胞而不会对细菌atp的测定造成显著影响；应用于实际天然水体的结果也表明，体细胞排除体系可为atp生物发光法准确测定环境样品中的细菌数量创造条件.本研究表明，经tritonx-100和apyrase酶处理后，基本能够排除体细胞和游离atp的干扰，得到天然水体中的实际细菌总数.
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