水稻花药绒毡层特异表达启动子的分离与表达载体构建

摘要从籼稻川75a(oryzasatival.)黄化苗叶片中直接提取基因组总dna.根据文献报道的水稻花药绒毡层特异启动子osg6b序列设计引物，采用touchdownpcr技术获得水稻花药绒毡层特异表达的启动子tsp1，将该片段克隆在载体pmd18-tvector上转化到大肠杆菌jm109，并酶切和pcr验证.序列分析发现，该片段与osg6b启动子同源性为96%，且具有真核生物启动子的多种特征序列，表明启动子tsp1为来源于籼稻川75a中的水稻花药绒毡层特异表达的启动子.利用该启动子对本实验室保存的质粒pib467和pib009进行改造，构建了一个可产生新型雄性不育系的双元植物表达载体pjh401.图7参13