水稻精细胞优势表达基因rssg58的启动子克隆和功能鉴定

摘要利用本实验室已经克隆的水稻精细胞优势表达基因rssg58的cdna序列与ncbi中的粳稻基因组文库进行比对、定位，结合生物信息学方法分析预测基因上游的启动子序列.在此基础上设计引物，以粳稻oryzasativa(japonicacultivar？group)日本晴黄化苗总dna为模板，采用dna聚合酶链式反应(pcr)的方法扩增出基因上游1093bp和462bp两个不同长度的启动子缺失片段(分别命名为jp58b和jp58s)，测序结果显示，其具有大多数高等植物启动子的保守元件.进一步构建启动子片段的植物表达载体pbi121？jp58b和pbi121？jp58s，瞬时表达结果显示，两个启动子片段对报告基因gus均具有启动活性.图4参20