红豆杉内生真菌发酵培养基和原生质体制备酶系统的筛选

摘要在对红豆杉内生真菌(ozoniumsp.)适生碳源、氮源和生长情况研究的基础上，通过正交试验筛选了其发酵培养基和原生质体制备的酶系统；用l9(34)安排了四因素三水平并考虑交互作用的正交试验，对实验结果进行了分析.结果表明，最优的发酵培养基为果糖1%、蔗糖1%、蛋白胨0.2%、酵母粉0.5%、kh2po40.5%、mgso4？7h2o0.3%、vb10.001%；分离原生质体的最优酶系统为1.5%溶壁酶+0.5%蜗牛酶+1.5%纤维素酶+1.0%溶菌酶；用此酶系统在30℃条件下酶解3h，原生质体的产量达6.55×107个/ml酶液；经荧光素二醋酸酯(fda)染色评估原生质体活力，表明该条件下分离的原生质体活力较高，原生质体的再生率为2.56%.该研究为利用生物技术手段改良紫杉醇生产菌奠定了基础.图6表4参32