果胶酶基因在内生芽孢杆菌中的过表达及其对定殖的影响

为探讨果胶酶基因与内生芽孢杆菌在植物体内定殖的相关性，pcr克隆了2株内生芽孢杆菌的果胶酶全长基因，并将全基因序列插入穿梭载体pgfp4412，构建了果胶酶基因过表达载体，转化内生细菌实现了果胶酶过表达.平板果胶酶酶活检测表明野生菌的水解圈直径仅为过表达突变体水解圈直径的50%.通过实时荧光定量pcr分析突变体和对照菌株（bs2-gfp和tb2-gfp）中果胶酶基因的表达情况，发现突变体的表达量分别是对照菌株表达量的82和85倍.统计了突变体与对照菌株28d内在小白菜各组织中的定殖数量，结果表明：接种后1-3d，突变体在根茎叶中的定殖数量与对照菌株比较，差异性显著（p＜0.05）.接种后7-28d，除第7天（d7）过表达菌株与对照菌株在根中的定殖菌量有显著性差异（p＜0.05）外，其余统计结果均无显著性差异（p＞0.05）.在为期28d的分离过程中，突变体的定殖数量经历了一个由显著高于对照菌株，到略高或逐渐与对照菌株的菌量趋于一致的过程.本研究初步证明了果胶酶基因在内生芽孢杆菌的定殖初期起到了一定的作用.图7表2参23