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ISSN: 2333-9721
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?内含肽介导的鼠多瘤病毒样颗粒生产表达和纯化

DOI: 10.11784/tdxbz201308041, PP. 315-320

Keywords: 鼠多瘤病毒,病毒样颗粒,亲和色谱,vp1,自组装,内含肽,自剪切

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Abstract:

?鼠多瘤病毒样颗粒(vlps)可由结构蛋白vp1自组装而成,可用于疫苗开发、基因治疗、药物传递和生物材料等方面.针对目前vp1生产中需要凝血酶去除谷胱甘肽s-转移酶(gst)标签,生产成本较高、操作复杂的问题,利用内含肽(intein)自剪切的特征,将内含肽插入到vp1与gst标签之间进行融合表达,表达产物经亲和色谱纯化,并通过改变柱内ph值、温度诱导内含肽剪切,使vp1与gst-intein分离从而获得vp1蛋白,产量为4,mg/(l培养基).纯化的vp1可自组装成与天然鼠多瘤病毒样颗粒一致的vlps.结果表明,内含肽介导鼠多瘤病毒样颗粒生产纯化流程简单易行,且无需凝血酶参与,大幅降低成本,为vlps的高效制备奠定了基础.

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