vhl慢病毒表达和干扰载体的构建及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响

目的构建人vhl重组慢病毒表达载体及干扰载体，建立稳定转染细胞株，观察vhl对肾癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法构建pzsgreen1-vhl及pll3.7-shvhl重组慢病毒载体，与3质粒包装系统用脂质体法共同转染293t细胞，包装成病毒颗粒，分别感染a498、caki-1细胞，并进行rt-pcr和westernblot检验细胞中vhl的表达。用mts法和流式细胞仪检测vhl对肾癌细胞增殖和凋亡效应的影响。结果重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功，转染后vhl在细胞中表达明显变化；vhl过表达细胞的增殖速度明显低于各对照组，而凋亡率明显高于各对照组；vhl干扰细胞的增殖速度明显高于各对照组，而凋亡率明显低于各对照组（p<0.05）。结论vhl对肾癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。