抗恶性疟原虫eba-175单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的制备抗恶性疟原虫eba-175的单克隆抗体(mcab),为恶性疟原虫的诊断及疫苗研究奠定基础。方法以恶性疟原虫eba-175(ii区f2段)重组抗原免疫balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mcab,间接elisa筛选分泌高滴度mcab的杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,elisa、westernblot试验分析其特异性。结果筛选获得6株稳定分泌抗重组eba-175mcab的杂交瘤细胞株1f3、2e8、2h5、4a1、4c3、4h9,6株mcab经鉴定其亚类5株为igg1,1株为igg2a,6株mcab的培养上清elisa效价为1:256~1:512,腹水效价为1:12800~1:25600,间接elisa显示其中4株mcab1f3、2h5、4a1、4h9能与恶性疟原虫抗原发生特异性结合,而只有1f3、4a1、4h9在westernblot试验中识别恶性疟原虫mr约35000的虫源蛋白。结论获得了能稳定分泌高特异性抗eba175mcab的杂交瘤细胞。