新型合成三肽抑制巨噬细胞精氨酸转运

目的观察新型合成三肽[arg(no3)-lys(och3)-arg(no3)]对巨噬细胞株(raw264．7)左旋-精氨酸／一氧化氮(l-arg／no)途径的影响。方法培养的巨噬细胞(培养液中含l-arg0．5mmol／l)加入脂多糖(lps,1μg/l)随机分为3组(每组n=6),分别加入双蒸水、三肽(1×10-4mol／l)、ng甲基-l-精氨酸(l-nmma,1×10-4mol／l),对照组只含l-arg(n=6),作用24h后,检测亚硝酸盐(no2-)、3h-l-arg转运量;培养的巨噬细胞[培养液中含l-arg(0-2mmol／l)]加入lps(1μg／l)24h后,检测no2-;培养的巨噬细胞(培养液中含l-arg0．5mmol／l)加入lps(1μg/l)后分别加三肽[(0-10)×10-4mol／l]24h后,检测no2-、3h-l-arg转运量。结果lps刺激细胞产生no的量和l-arg率转运分别为非刺激组的50倍和2．7倍,三肽(1×10-4mol／l)即可明显降低no的生成及抑制l-arg的转运(分别降低71％、67％),较l-nmma(1×10-4mol／l)作用要强(p<0．05);no的生成依赖于细胞外l-arg,并成浓度依赖性,其米氏常数(km):(0．162±0．015)mmol／l、最大转运速率(vmax):(91．2±2．3)μmol／(24h？106cells);三肽成浓度依赖性的降低细胞l-arg转运和no的生成,半数有效抑制剂量(ec50)分别为0．21×10-4mol／l、1．27×104mol／l。结论lps作用于巨噬细胞引起l-arg转运增加:三肽通过抑制细胞l-arg转运及与l-arg竞争性结合一氧化氮合酶作用位点,影响no的生成。