短干涉rna特异性抑制白血病细胞中肺耐药相关蛋白基因表达(英文)

背景和目的双链rna特异性地降解相应序列的mrna,导致转录后水平的基因沉默.肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关.本研究旨在探讨自行设计的lrp特异性sirna能否发挥特异性降解lrpmr-na、抑制蛋白质表达的作用.方法构建lrp真核表达载体pcdna3.0/lrp.以pcdna3.0/lrp、pegfp-c1、二者的特异性sirna分别组和,转染k562细胞.以rt-pcr方法和流式细胞术检测lrpmrna和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测gfp的表达的变化.结果k562细胞转染pcdna3.0/lrp后,lrpmrna水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30%;lrp特异性sirna与pcdna3.0/lrp共同转染k562细胞,lrpmrna和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;lrp特异性sirna与pegfp-c1共同转染k562细胞,gfp的表达与pegfp-c1单独转染无差异;gfp特异性sirna与pcdna3.0共同转染k562细胞,lrpmrna水平和蛋白质表达与pcdna3.0/lrp单独转染无差异.结论lrp特异性sirna在k562细胞中能够特异性地降解lrpmrna、抑制其蛋白质表达.该研究将为利用sirna逆转lrp引起的白血病细胞mdr奠定理论基础.