人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备(英文)

？目的克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(hunse)基因,制备hunse多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断。方法经rt-pcr扩增hunse基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pqe30,在大肠杆菌m15中诱导表达hunse蛋白,蛋白经ni-nta亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用elisa、westernblotting和免疫组化鉴定。结果所表达的hunse蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的hunse特异性抗血清具有良好的免疫反应性。westernblotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的nse蛋白。结论nse基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的nse特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究。