病毒载体介导bdnf基因表达在大鼠神经元ad模型中的作用

目的探讨重组腺伴随病毒(raav)载体介导表达人脑源性神经营养因子(hbdnf)基因以及表达的hbdnf对β淀粉样蛋白(aβ)诱导的ad模型神经元保护效应的机制。方法使用分子克隆技术克隆了hbdnf基因,并且构建了携带hbdnf基因的raav病毒载体(aav-hbdnf),使用病毒载体转染aβ诱导损伤的海马神经元。使用mtt检测和流式细胞仪分析观察细胞凋亡变化,同时使用免疫细胞化学技术检测了bdnf蛋白以及bcl-2抗凋亡蛋白的表达,使用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度([ca2+]i)的变化。结果结果显示重组病毒对培养的海马神经元进行了有效的转染,bdnf蛋白表达水平明显增高,表达的bdnf对aβ诱导的神经元损伤有显著的保护效应,在bdnf治疗组表现出抗凋亡蛋白bcl-2的表达增高和有效地维持了[ca2+]i平衡。结论表达的bdnf通过抑制aβ依赖的细胞内钙超载和增加抗凋亡蛋白bcl-2的表达,有效地保护神经元抵抗aβ神经毒性引起的凋亡。?