重组腺病毒介导hcgpx转染致血管内皮细胞产生抗氧化损伤作用的研究

目的研究重组腺病毒介导的人胞浆型谷胱甘肽过氧化物酶(hcgpx)转染对血管内皮细胞ecv304氧化损伤保护作用。方法将含hcgpxcdna的质粒pgem-t-hcgpx和重组腺病毒载体paccmv-plpa穿梭质粒进行基因重组,构建成paccmv-hcgpx穿梭质粒后,与包装质粒pjm17共转染293细胞,构建成重组腺病毒adcmv-hcgpx。用adcmv-hcgpx转染体外培养的ecv304细胞并分为转染24、48和72h组,以转染空载体的细胞为对照组,检测转染细胞的基因表达水平。各组ecv304细胞经h2o2氧化损伤处理后,分别对细胞的活力和凋亡进行检测分析。结果各转染组细胞转染基因表达率均显著高于对照组(p<0.01)。经h2o2氧化损伤处理后,adcmv-hcgpx转染组细胞活力较对照组明显增强,凋亡受到抑制。结论重组腺病毒介导的hcgpx转染可保护ecv304细胞抵抗氧化损伤,具有明确的细胞保护作用,其具体保护机制可能与抗氧化和抑制细胞凋亡有关。?