雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化

目的探讨骨形态发生蛋白-2（bmp-2）/smad通路在雷奈酸锶（sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（bmscs）分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠bmscs，根据实验目的加入不同浓度sr、bmp-2的拮抗剂noggin及smad1小干扰rna（sirna）。酶标法检测碱性磷酸酶（alp）活性，茜素红染色检测钙结节，westernblotting法检测磷酸化smad1/5/8及runt相关转录因子-2（runx2）蛋白的表达。结果应用0.1~10mmol/lsr处理bmscs细胞1h后，细胞内磷酸化smad1/5/8表达增高，其中浓度为1mmol/l时，表达达到高峰；在sr处理bmscs前，应用bmp-2拮抗剂noggin预处理细胞2h能抑制sr对磷酸化smad1/5/8表达的上调作用；应用0.1~5mmol/lsr处理细胞6h后，细胞内runx2表达增高，其中浓度为1mmol/l时，表达达到高峰；在sr处理bmscs前，应用smad1sirna转染细胞后能下调smad1/5/8、磷酸化smad1/5/8的表达，并抑制sr对runx2表达的上调作用，还拮抗sr对alp活性及钙化结节形成的促进作用。结论bmp-2/smad通路参与了sr促进bmscs成骨分化。