ram-hplc在线富集技术检测脑脊液中利福平的浓度

目的建立大体积直接进样的限进性液相色谱（ram-hplc）法，实现脑脊液样品的在线直接进样富集并检测脑脊液中的利福平。方法以自制限进性填料柱为前处理柱，lunac18为分析柱，前处理流动相为水？甲醇（95∶5，v/v），流速为1ml/min，分析流动相为甲醇-乙腈-10mmol/l乙酸铵溶液（60∶5∶35，v/v/v），柱温为25℃，检测波长为254nm。结果选择100μl为进样体积，其峰面积是进样量为20μl时的5.33倍，有效提高了hplc的检测灵敏度。利福平在0.25~8μg/ml的浓度范围内浓度和峰面积具有良好的线性关系（r=0.9997），lod和loq分别为0.07μg/ml和0.25μg/ml，日内日间精密度均小于5%，低中高3个浓度下的空白加样回收率为87.69%~102.11%，测定给药（剂量为10mg/kg）2h后的人脑脊液中利福平浓度为0.29μg/ml。结论该方法简单快速，适用于脑脊液中利福平的富集检测，满足临床个体化用药指导。