mir-181c靶向己糖激酶2抑制癌相关成纤维细胞的糖酵解

目的探讨mir-181c在癌相关成纤维细胞（cafs）糖酵解中的作用和机制。方法用组织贴壁法分离原代肺腺癌病人肺组织caf及肺正常成纤维细胞（nfs）。用lipofectaminetm2000转染mir-181cmimics，mir-181cinhibitor，sirna-hk2和hk2-vecto等；q-pcr检测mir-181家族表达水平；westernblotting检测己糖激酶2（hk2）蛋白表达；2-nbdg法检测细胞葡萄糖摄取率；dry-chemfcd3500仪器检测细胞上清中乳酸生成；双荧光素酶报告基因系统检测hk2mrna表达。结果在细胞形态上cafs与nfs无明显区别。与nfs组相比，cafs组葡萄糖摄取、乳酸生成和hk2蛋白表达明显增加，而mir-181家族表达明显减少（p<0.05）。在nfs转染inhibitor-181c后，其hk2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显增加（p<0.05）；相反，cafs转染了mimics-181c后，其hk2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显减少（p<0.05）。并且在敲低hk2细胞的cafs中，mimics-181c不能减少葡萄糖摄取和乳酸生成；而mimics-181c可以减少过表达hk2对nfs葡萄糖摄取和乳酸生成的增强作用。结论mir-181c可以通过抑制hk2的蛋白表达来抑制cafs的糖酵解。