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南方医科大学学报 2015
mir-181c靶向己糖激酶2抑制癌相关成纤维细胞的糖酵解Keywords: 癌相关成纤维细胞,mir-181,己糖激酶2,糖酵解 Abstract: 目的探讨mir-181c在癌相关成纤维细胞(cafs)糖酵解中的作用和机制。方法用组织贴壁法分离原代肺腺癌病人肺组织caf及肺正常成纤维细胞(nfs)。用lipofectaminetm2000转染mir-181cmimics,mir-181cinhibitor,sirna-hk2和hk2-vecto等;q-pcr检测mir-181家族表达水平;westernblotting检测己糖激酶2(hk2)蛋白表达;2-nbdg法检测细胞葡萄糖摄取率;dry-chemfcd3500仪器检测细胞上清中乳酸生成;双荧光素酶报告基因系统检测hk2mrna表达。结果在细胞形态上cafs与nfs无明显区别。与nfs组相比,cafs组葡萄糖摄取、乳酸生成和hk2蛋白表达明显增加,而mir-181家族表达明显减少(p<0.05)。在nfs转染inhibitor-181c后,其hk2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显增加(p<0.05);相反,cafs转染了mimics-181c后,其hk2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显减少(p<0.05)。并且在敲低hk2细胞的cafs中,mimics-181c不能减少葡萄糖摄取和乳酸生成;而mimics-181c可以减少过表达hk2对nfs葡萄糖摄取和乳酸生成的增强作用。结论mir-181c可以通过抑制hk2的蛋白表达来抑制cafs的糖酵解。
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