狼毒大戟提取物通过nf-κb通路激活潜伏hiv

目的研究狼毒大戟提取物对潜伏hiv激活的影响，探讨其激活潜伏hiv可能的机制以及清除hiv的作用。方法取新鲜狼毒大戟植物根部组织，液氮速冻并粉碎成末，冷冻干燥3d后称取少量，采用丙酮一步法提取并浓缩。以甲醇-水为流动相，采用hplc反相c18柱分离，并通过ms鉴定后，得到狼毒大戟提取物（efe）。以潜伏hiv细胞系j-lat10.6为激活模型，以tnf-α（10ng/ml）作为阳性对照，efe（50μg/ml）处理24h后，采用facs分析gfp阳性率以观测激活活性。采用不同浓度nf-κb抑制剂（bay11-7082）抑制efe活性，并用wb检测2h内p65入核水平，以及24h内hiv蛋白p24随时间点变化情况。结果丙酮一步法可简便快速从狼毒大戟植物中提取得到efe，经鉴定含prostratin及其类似物，分离后测得其中prostratin浓度为0.53mmol/l。efe（50μg/ml）作用24h可产生约50%激活潜伏hiv活性，同时hiv蛋白p24水平随时间显著增加。进一步研究发现nf-κb通路抑制剂（bay11-7082）可对efe活性产生浓度依赖抑制作用，且2h内胞核p65水平在efe作用下增加明显。结论狼毒大戟提取物efe含有效成分prostratin及其类似物，可产生较强激活潜伏hiv活性，其机制为通过激活nf-κb通路促进p65入核从而发挥作用。