抗凝组分acoagulatin的纯化鉴定及其抗凝特性

目的从蝮蛇毒中分离纯化一种组分acoagulatin并进行鉴定,观察其抗凝作用。方法经deae-sepharosefastflow和cm-sepharosefastflow离子交换柱层析,从蝮蛇毒中分离、纯化得到acoagulatin,分别采用biosep-sec-s2000型hplc分子筛柱层析、还原性sds-page(5%浓缩胶,12%分离胶)电泳进行纯度和相对分子质量测定,将不同浓度acoagulatin与抗凝兔血混合,测定凝血时间(tt)、凝血酶原时间(pt)、部分凝血活酶时间(aptt)。结果acoagulatin的相对分子质量为31400,由两个亚基组成,相对分子质量分别为14400和17000,能显著地延长pt和aptt,对tt没有影响。结论采用deae-sepharosefastflow和cm-sepharosefastflow两种离子交换柱层析分离蛇毒,能分离出纯度高的组分acoagulatin,该组分具有抗凝活性。