下调mir-21可以增强食管癌te-1细胞的放射敏感性

目的研究mir-21下调对食管癌te-1细胞的放射敏感性的影响。方法采用慢病毒介导的方法将含有反义mir21表达基因的载体转染至食管癌te-1细胞系，嘌呤霉素筛选稳定下调mir21的食管癌细胞亚系，命名为te-1-mir21-；荧光定量pcr检测te-1-mir21-中mir21的相对表达量；细胞克隆形成实验测定te-1和te-1-mir21-细胞的放射敏感性；rt-pcr和western-blot法测定te-1和te-1-mir21-细胞中β-catenin的变化；流式细胞术检测te-1和te-1-mir21-细胞中p75ntr+细胞的比例。结果成功构建稳定下调mir21的食管癌细胞亚系te-1-mir21-，荧光定量pcr结果显示mir21表达量明显下调；细胞克隆形成实验提示te-1-mir21-细胞较te-1细胞的放射敏感性明显增强；rt-pcr结果分析显示，te-1-mir21-细胞与te-1细胞的β-cateninmrna的表达量无明显差异；westernblot的结果分析显示，te-1-mir21-细胞在接受高剂量照射（8gy，10gy）时，β-catenin蛋白量明显下降；流式细胞仪分析结果显示，te-1-mir21-细胞中p75ntr+细胞的比例较te-1细胞明显降低。结论下调mir21可以增强食管癌te-1细胞的放射敏感性；下调mir21增强放射敏感性的机制可能与wnt/β-catenin信号通路的活化程度降低以及食管癌te-1细胞中p75ntr+细胞比例减少有关。