钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞凋亡中的作用

目的研究钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子（mpp+）诱导sh-sy5y细胞凋亡中的作用。方法mtt法检测细胞存活率；hoechst33342和annexinv+pi染色检测mpp+诱导人神经神经母细胞瘤sh-sy5y细胞的凋亡作用；westernblot检测parp蛋白表达的变化；罗丹明123染色检测mpp+对sh-sy5y细胞线粒体膜电位的影响；激光共聚焦显微镜检测mpp+对sh-sy5y细胞胞质钙、线粒体钙和内质网钙浓度的影响以及线粒体钙通道抑制剂钌红与mpp+联合应用对线粒体游离钙浓度、胞质游离钙浓度的影响。结果mpp+导致sh-sy5y细胞存活率下降且具有剂量-反应关系、mpp+能导致sh-sy5y细胞凋亡、mpp+导致sh-sy5y细胞线粒体膜电位下降、mpp+使sh-sy5y细胞胞质和内质网游离钙离子浓度下降而使线粒体游离钙离子浓度上升。钌红可对抗mpp+诱导的sh-sy5y细胞凋亡、阻止线粒体膜电位下降，减少parp的切割片段以及阻断线粒体游离钙浓度的上升。结论线粒体钙超载在mpp+诱导的sh-sy5y细胞凋亡中起重要作用。mpp+诱导人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞的凋亡可能与细胞质、线粒体及内质网的钙稳态失衡有关。