流式细胞仪用鸡红细胞的制备

目的制备稳定可用的流式细胞仪校准用鸡红细胞。方法引入明胶沉降、无ca2+hank’s平衡盐缓冲液处理及低速离心等方法对传统鸡红细胞分离方法进行改良；并采用tritonx-100打孔及rnase酶降解rna的方法增强细胞dna染色效果，检测所得新鲜细胞活率及固定后细胞dna含量在流式细胞仪上的变易系数（cv）值，并与传统方法获得的鸡红细胞进行对比。结果改良后方法获得的鸡红细胞活率（98.5±3.5）%高于传统方法（93.5±2.7）%（p<0.05）。经戊二醛固定后，该细胞在90d的保存时间内基本稳定，且其cv值显著低于传统方法[（6.0±0.3）%~（6.2±0.4）%vs（8.6±0.5）%~（13.1±1.4）%，p<0.01）]。结论改良后方法获得的鸡红细胞可被开发作为流式细胞仪校准的有效工具。