mcp-3对人脐静脉内皮细胞表达icam-1、vcam-1、tf/tfpi及其凋亡的影响

目的研究单核细胞趋化因子-3（mcp-3）对人脐静脉内皮细胞（huvecs）表达icam-1、vcam-1、tf、tfpi及其凋亡的影响。方法分离、培养人脐静脉内皮细胞，分别给予0~3.0ng/ml的mcp-3进行干预，确定mcp-3对huvecs的最适作用浓度，以此浓度干预huvecs，在mcp-3加药之前1h分别给予mcp-3抗体（20ng/ml）、pi3k抑制剂ly-294002（5mmol/ml）处理细胞，mcp-3作用24h后提取各组总rna、总蛋白，用rt-pcr、westernblot分别检测干预后的icam-1、vcam-1、tf、tfpi的表达。模拟病理状态，用ox-ldl干预huvecs与空白组对照，24h后提取各组总rna、总蛋白，用rt-pcr、westernblot分别检测各组mcp-3表达情况。最后，用mcp-3及mcp-3+ccr2拮抗剂rs102895（6μmol/l）分别干预huvecs，作用24、48h分别检测huvecs凋亡率及caspase3的表达，并与空白对照组比较。结果mcp-3对huvecs的最适作用浓度为0.3ng/ml（p<0.05）；mcp-3可诱导huvecs细胞中icam-1、vcam-1、tf表达的增加，同时可抑制tfpi表达（p<0.05）；mcp-3抗体和ly-294002可分别拮抗、抑制此作用（p<0.05）；ox-ldl可上调huvecs表达mcp-3（p<0.05）；作用24、48h后mcp-3可明显诱导huvecs凋亡，ccr2抑制剂可拮抗此作用。结论ox-ldl可诱导huvecs表达mcp-3，mcp-3可诱导huvecs凋亡，且可能部分通过pi3k信号通路影响huvecs功能。