靶向survivin的sirna诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的采用rna干扰技术(sirna)阻断survivin基因的表达,观察其抑制胰腺癌细胞增殖及诱导胰腺癌细胞凋亡的作用。方法构建靶向survivin的sirna质粒表达载体,采用lipofectaminetm2000转染胰腺癌细胞pc-2,采用半定量rt-pcr、免疫组化技术检测转染前后pc-2细胞survivin基因表达的变化;采用mtt法检测对pc-2细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测其诱导pc-2细胞凋亡的作用。结果靶向survivin的序列特异性的sirna可以高效地抑制pc-2细胞survivin基因表达,在mrna水平其表达抑制率为81．25％,在蛋白质水平其表达抑制率为74．24％。转染靶向survivin的sirna质粒表达载体可以显著抑制pc-2细胞的增殖,细胞接种24、48h后其增殖抑制率分别为28．00％和33．38％;转染后24、48h可以诱导8．46％、7．53％的细胞凋亡。结论所构建的靶向survivin的sirna质粒表达载体可以有效地阻断pc-2细胞survivin基因表达,阻断survivin基因表达可以显著地抑制pc-2细胞的增殖并在一定程度上诱导其凋亡,靶向survivin的sirna在胰腺癌的基因治疗中具有一定的价值。?更多