二甲双胍对人口腔癌kb细胞增殖及凋亡的影响

目的研究二甲双胍(metformin）对人口腔癌kb细胞增殖及凋亡的影响，以期为口腔癌的治疗开辟新的路径。方法mtt法检测不同浓度（1.25、2.5、5、10、20mmol/l）二甲双胍处理口腔癌kb细胞24、48、72h后对细胞增殖的影响；分别用0.25、0.5、1mmol/l的二甲双胍处理kb细胞，8d后观察其对集落克隆形成的影响；5mmol/l二甲双胍处理细胞24h，线粒体膜电位检测试剂盒（jc-1）检测线粒体膜电位的变化；pi单染检测二甲双胍对kb细胞凋亡的影响；westernblot检测二甲双胍（5mmol/l）处理kb细胞不同时间（0、6、16、24h）grp78以及caspase-3的表达。结果二甲双胍处理细胞后，对kb细胞的增殖有明显的抑制作用，并且呈药物浓度和时间依赖性。5mmol/l的二甲双胍处理kb细胞24、48、72h的存活率为68.0%、36.9%、14.5%，但24h细胞凋亡率仅为11.99%，将浓度加大后凋亡率为24.11%，高于对照组；二甲双胍抑制kb细胞集落克隆的形成；jc-1荧光检测，红绿荧光的相对比例降低，提示膜电位下降；二甲双胍刺激口腔癌kb细胞grp78的表达先上调后有减弱趋势，并且能诱导caspase-3的激活。结论二甲双胍能显著抑制kb细胞的增殖并且诱导细胞凋亡，其机制与线粒体凋亡途径的激活以及过度的内质网应激有关。