共价结合血管内皮生长因子促进内皮祖细胞在去细胞瓣上的粘附和增殖

摘要：目的对去细胞主动脉瓣进行聚乙二醇（peg）交联和血管内皮生长因子（vegf）共价结合，以改善去细胞主动脉瓣生物学性能。方法枝化状聚乙二醇末端的丙烯酰基与引入到去细胞主动脉瓣上的巯基，通过迈克尔加成反应完成对去细胞主动脉瓣的peg交联；通过peg交联去细胞主动脉瓣上的未饱和丙烯酰基与vegf中半胱氨酸残基上的巯基发生另一个迈克尔加成反应，对去细胞主动脉瓣进行vegf共价结合，酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定vegf修饰效果；在去细胞主动脉瓣、peg交联去细胞主动脉瓣和vegf共价结合的peg交联去细胞主动脉瓣上种植内皮祖细胞，培养10d后行瓣膜上dna含量测定、苏木素-伊红染色和扫描电镜。结果免疫荧光和elisa检测显示：每片peg交联去细胞主动脉瓣最大结合（908.94±0.27）pgvegf；与去细胞主动脉瓣和peg交联去细胞主动脉瓣相比，vegf共价结合的peg交联去细胞主动脉瓣明显促进内皮祖细胞的黏附和增殖，并且可在瓣膜表面形成一层连续的单细胞层。结论借助peg，vegf能有效地共价结合去细胞主动脉瓣，促进细胞的粘附和增殖，有利于组织工程心脏瓣膜的构建。