蛋白激酶c抑制剂对高糖致血管内皮细胞高通透性的保护作用

目的探讨不同浓度糖对人脐静脉内皮细胞通透性的影响，以及蛋白激酶c（pkc）抑制剂ro-31-8425对高糖刺激下血管内皮的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株（ea.hy926），选取3~4代细胞进行实验。分为对照组（5.5mmol/l）、糖刺激组（10、15、20、25.5、30mmol/l），采用测定异硫氰酸萤光素-右旋糖酐（fitc-dx）透过transwell小室荧光强度的方法，研究不同浓度高糖对ea.hy926单层细胞通透性的影响。再选取25.5mmol/l为高糖组，此时可分为对照组（5.5mmol/l）+生理盐水、高糖（25.5mmol/l）+生理盐水组、高糖（25.5mmol/l）+pkc抑制剂ro-31-8425（10μmol/l）组，进而探讨高糖对pkc蛋白水平的影响以及pkc抑制剂ro-31-8425对通透性改变的作用。结果高于正常血糖的各浓度糖刺激组均可使ea.hy926血管内皮细胞通透性明显增加（p<0.01），并呈浓度依赖性。25.5mmol/l高糖可导致pkcα以及pkcβⅱ磷酸化水平上升（p<0.01）。pkc抑制剂ro-31-8425预处理组可通过抑制高糖刺激下pkcα、pkcβⅱ磷酸化水平上升（p<0.01），从而抑制血管内皮细胞通透性增加（p<0.01）。结论高糖可通过激活pkc导致血管内皮细胞通透性受损，pkc抑制剂ro-31-8425可以降低通透性，起到一定的保护作用。