hiv-1crf07_bc毒株gp41nhr结构域n51的表达及结构分析

目的对来源于hiv-1中国流行株crf07_bc的包膜糖蛋白gp41nhr结构域的n51进行表达和结构及抗原性分析。方法运用重叠延伸pcr方法扩增出n51fd基因，将其插入真核表达载体pfuse-higg1-fc2，并进行核苷酸序列测定。利用生物信息学软件、圆二色谱法、免疫印迹法对表达的n51fdfc-bc重组蛋白进行结构和抗原性分析。结果成功构建pfuse/n51fd-bc表达载体，并在真核表达体系实现了目的蛋白的高效表达。免疫印迹结果显示该重组蛋白大小约为35000，可与抗hiv-1gp41n/c多肽的抗体反应。生物信息学分析显示n51fdfc-bc重组蛋白相对分子质量为34315.1，等电点pi为7.59，且形成了无规则卷曲结构，易于与抗体反应，可作为抗原。圆二色谱的分析与生物信息学软件预测的结果一致。结论n51fdfc-bc重组蛋白具有无规则卷曲结构，可适合作为hiv-1亚单位疫苗的免疫原。