小腿肌肉移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠糖尿病足溃疡的疗效观察

：目的评价骨髓间充质干细胞（bm-mscs）经小腿肌肉移植对大鼠糖尿病足溃疡（dfus）的治疗效果。方法全骨髓贴壁法体外培养雄性wistar大鼠bm-mscs至第3代，经4,6-联脒-2-苯基吲哚（dapi）标记。36只雄性wistar大鼠随机分成a组（bm-mscs小腿肌肉移植组，n=12）、b组（正常足溃疡对照组，n=12）和c组（dfus对照组，n=12）。大鼠糖尿病经腹腔注射链脲佐菌素（stz）诱导，然后在其双后足背上切取3mm×7mm矩形全层皮肤制成大鼠dfus模型。于移植后第2、5、8、11天评估各组大鼠的创面愈合率，冰冻切片观察dapi标记的bm-mscs在创伤组织中的示踪，肉芽组织的厚度采用he染色法检测，cd31和ki-67的表达采用免疫组化法检测，血管内皮细胞生长因子（vegf）在创伤组织中的表达水平采用elisa和rt-pcr检测。结果b组的创面愈合最快（p<0.05），第8、11天a组的创面愈合率高于c组（p<0.05）。冰冻切片发现a组荧光强度和区域在第5天时达到高峰。he染色结果显示第5天a、b两组的肉芽组织厚度相同，但比c组厚。cd31和ki-67的免疫组化发现a、b两组的平均阳性小血管数和细胞数无差异，但与c组相比有差异（p<0.05）。elisa和rt-pcr结果均显示，第11天a组的vegf表达水平明显较对照组高（p<0.001）。结论bm-mscs经小腿肌肉移植能明显促进大鼠dfus的愈合，这种促愈疗效可能是通过促进创伤组织中vegf的表达实现的。