检测肠出血性大肠埃希菌o157:h7的环介导等温扩增和pcr法比较

目的建立基于环介导等温扩增（lamp）技术的肠出血性大肠埃希菌（ehec）o157：h7快速简便检测方法，并与pcr进行比较。方法针对eheco157：h7保守的rfbe基因序列，设计特异性引物，建立lamp和pcr检测技术并优化其反应条件，比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果。结果成功建立了lamp和pcr检测体系，灵敏度检测结果显示，lamp检测限低至10cfu/ml，pcr检测限为102cfu/ml，lamp检测灵敏度高于pcr；对39株近源菌进行检测，结果显示，lamp法仅7株eheco157：h7得到阳性结果，非eheco157：h7菌株均为阴性，pcr产物则出现非特异性条带，lamp法特异性比pcr法高。对于32份猪肉样品的检测，lamp和pcr与常规检测结果一致，3份样品检测阳性。结论lamp检测技术的特异性和灵敏度较pcr高，并且操作简便、检测成本低，耗时短，更有望发展成为快速准确检测eheco157：h7的有效手段。