慢病毒介导lox-1基因rna干扰抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡

摘要：目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体（lox-1）rna干扰慢病毒表达载体并观察lox-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠lox-1的shrna序列，将shrna序列插入到plentilox3.7（pll3.7）慢病毒载体中，构建慢病毒载体pll3.7-lox1。慢病毒载体及包装载体dr8.9、vsvg共转染293ft细胞包装慢病毒。慢病毒侵染h9c2大鼠心肌细胞，rt-pcr鉴定对lox-1抑制效率，cck-8、hochest33258染色检测lox-1对h2o2诱导h9c2心肌细胞凋亡的影响。结果通过双酶切鉴定，证实shrna正确插入慢病毒载体，dna测序证实插入的序列正确，抑制lox-1能抑制h2o2诱导的细胞活力下降，减轻h2o2诱导的心肌细胞凋亡，与h2o2组比较均有统计学意义(p<0.01)。结论成功构建靶向大鼠lox-1基因rnai慢病毒载体，lox-1激活可能在h2o2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用。