nk-22细胞及il-22相关功能分子在类风湿关节炎滑膜细胞增殖中的作用

目的探讨类风湿关节炎（ra）患者滑液（sf）自然杀伤（nk）细胞nk-22促成纤维样滑膜细胞（fls）增殖作用及相关信号通路。方法采用流式细胞术分选6例ra患者sf中nk-22细胞（2×104），体外悬浮培养2周，佛波酯（20ng/ml）和离子霉素（0.5μmol/l）刺激后elisa检测nk-22细胞培养上清il-22浓度。组织块培养法原代培养rafls，nk-22细胞培养上清分别作用于rafls24、48、72h，mtt法检测fls增殖；同时加入il-22抗体检测fls增殖情况。rt-pcr检测rhil-22及ag490作用后raflsstat3mrna的表达，westernblot检测raflsp-stat3蛋白含量。结果①流式分选2×104nk-22细胞，细胞纯度>90%；②pma和ionomycin刺激后nk-22细胞培养上清中il-22浓度为1273.42±254.48pg/ml；③pma和ionomycin刺激后nk-22细胞培养上清作用于rafls24h、48h、72h，可明显刺激rafls增殖（p<0.05）。il-22抗体能明显抑制nkp44+nk细胞上清诱导的rafls增殖（p<0.01）；④rhil-22（1ng/ml）能诱导raflsp-stat3表达（p<0.05）；⑤ag490能抑制rhil-22诱导的raflsp-stat3表达（p<0.05）。结论ra患者sfnk-22细胞体外可分泌高浓度的il-22，通过激活stat3信号通路进而刺激rafls增殖。