雷公藤甲素通过抑制逆转录病毒herv-knp9基因转录诱导人急性t淋巴细胞白血病jurkat细胞凋亡

目的探讨雷公藤甲素诱导人急性t淋巴细胞白血病jurkat细胞凋亡分子机制。方法mtt检测雷公藤甲素对jurkat细胞的增殖抑制作用，然后用originpro8计算出ic50。按照0、2、4、8、16nmol/l浓度雷公藤甲素处理jurkat细胞48h，然后用流式细胞仪检测细胞凋亡变化。用半定量rt-pcr法检测加药处理后各组np9基因mrna的表达水平变化并用kodak1d3.6软件对条带进行定量分析。采用统计软件分析np9转录抑制与细胞凋亡的相关性。westernblotting检测np9下游信号分子c-myc，β-catenin，erk，akt和notch1蛋白的变化。结果雷公藤甲素呈剂量依赖性抑制jurkat细胞的增殖，其ic50为12.7nmol/l。雷公藤甲素呈剂量依赖诱导jurkat细胞凋亡。进一步实验研究结果显示，雷公藤甲素呈剂量依赖方式抑制jurkat细胞中np9基因的mrna的转录水平。经统计分析发现np9转录抑制与细胞凋亡之间具有显著的相关性（r2=0.907）。westernblotting方法结果发现雷公藤甲素在抑制np9mrna转录同时伴有其下游信号分子c-myc，β-catenin，erk，akt和notch1蛋白表达水平降低。结论下调herv-knp9mrna及其下游信号分子c-myc，β-catenin，erk，akt和notch1蛋白水平是雷公藤甲素诱导人急性t淋巴细胞白血病jurkat细胞凋亡的重要分子机制之一。