敲低msx2对胰腺癌panc-1细胞上皮-间充质转化的影响

目的研究msx2基因在胰腺癌panc-1细胞的上皮-间充质转化（emt）/间充质-上皮转化（met）转变中的作用。方法通过脂质体2000将含有msx2干扰序列的质粒（共3种，分别命名为shmsx2-1、shmsx2-2和shmsx2-3，转染空质粒的阴性对照组nc）转染panc-1细胞，利用real-timert-pcr、westernblot等技术检测msx2在基因和蛋白水平的表达，检测干扰效率，并选取干扰效率最高的一组用于后续试验；进而检测emt相关上皮标志分子e-cadherin、间质标志分子vimentin在基因和蛋白水平的表达变化；采用cck-8法检测干扰前后细胞的增殖能力变化，transwell和划痕试验比较细胞的侵袭转移能力变化。结果3组干扰质粒中shmsx2-1的干扰效率最高，cck-8试验结果显示敲低msx2可明显抑制panc-1细胞增殖能力，与对照组相比差异有显著性（p<0.05）；敲低msx2可明显抑制panc-1细胞的侵袭转移，差异有统计学意义（p<0.05）；emt相关分子e-cadherin表达升高，而vimentin表达降低，且与对照组相比均有统计学意义（p<0.05）；倒置显微镜下观察敲低msx2后细胞形态由松散的长梭形变成紧密连接的椭圆形。rt-pcr发现敲低msx2后转录因子twist和snail表达降低（p<0.05），而slug和zeb1表达变化无差异（p>0.05）。结论敲低msx2可抑制胰腺癌panc1细胞的增殖、侵袭转移能力，并且上皮标志分子e-cadherin表达升高，间质标志分子vimentin表达降低，有发生met的趋势，msx2可能通过twist、snail发挥其抑制作用