靶向沉默p65基因对人乳腺癌细胞mda-mb-231增殖及凋亡的影响

摘要：目的利用mirna靶向沉默p65基因，观察其对人乳腺癌细胞mda-mb-231增殖及凋亡的影响。方法以脂质体lipofectaminetm2000为载体，将针对特异靶点p65基因的mirna转染入mda-mb-231细胞。rt-pcr和westernblot法检测p65mrna和蛋白表达的变化；mtt法检测细胞增殖；流式细胞技术（fcm）检测细胞凋亡；westernblot法检测凋亡相关因子表达的变化。结果rt-pcr和westernblot检测结果显示，p65mirna转染组p65mrna及蛋白表达量较对照组显著下降（p<0.05）；mtt检测结果显示，沉默p65基因后，细胞出现了生长抑制现象；fcm检测结果发现，p65mirna转染组细胞凋亡率显著增加（p<0.05）。westernblot进一步检测发现，转染组细胞中caspase-3的前体蛋白条带变细，裂解片段条带加深；parp蛋白出现裂解片段。结论mirna靶向沉默p65基因可抑制人乳腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡，推测p65基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。