西尼罗河病毒prem/eⅲ融合蛋白特异性单克隆抗体的制备以及应用分析

摘要：目的制备针对西尼罗河病毒prem/eⅲ融合蛋白特异性单克隆抗体，并分析其在临床检测中的应用价值。方法采用原核表达系统表达西尼罗河病毒prem/e融合蛋白，作为抗原，免疫balb/c小鼠，按常规单克隆抗体技术将免疫后小鼠脾细胞与sp2/0细胞融合，采用有限稀释法筛选能稳定分泌抗prem/eⅲ单抗的杂交瘤细胞株。接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔，抽取腹水纯化单克隆抗体。采用间接elisa和westernblotting对抗体特异性和效价进行分析，并对临床样本进行检测。结果获得了1株能稳定分泌prem/eⅲ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为me1。纯化后抗体效价为10-6，其亚类为igg1。me1单抗能与西尼罗病毒prem/eⅲ蛋白以及西尼罗病毒发生特异性反应，而与日本脑炎病毒(jev)、圣路易斯脑炎病毒(slev)、黄热病毒(yfv)和登革热病毒(denv)无交叉反应。临床诊断准确率为97.78%。结论me1单克隆抗体具有较高的特异性，临床诊断准确性较高，具有临床应用价值。