高浓度氧暴露对n9小胶质细胞功能的影响

摘要：目的探讨常压高浓度氧暴露对n9小胶质细胞功能的影响。方法体外培养n9小胶质细胞，分别在900ml/l高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48h后（1）流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率；（2）dcfh-da荧光探针检测活性氧（ros）含量的变化；（3）rt-pcr检测toll样受体4（tlr4）mrna表达变化；（4）elisa检测n9细胞培养上清中il-1β和tnf-α的含量；（5）免疫荧光化学染色检测tlr4蛋白的表达变化。结果流式细胞术结果示，细胞凋亡率在高氧暴露12h后明显高于空气对照组（p<0.05），16h达高峰（p<0.01）；高氧暴露2h后，细胞内ros含量明显增加，呈一定时间依赖性；tlr4mrna及蛋白表达水平明显高于空气对照组（p<0.05）；高氧暴露后细胞上清中tnf-α及il-1β含量随暴露时间延长而增加，均在6h开始升高，12~16h达高峰（p<0.05），il-1β增高较tnf-α更为明显。结论高氧暴露后n9小胶质细胞tlr4通路激活，产生大量神经毒性因子（ros、il-1β及tnf-α），细胞凋亡增加。