e2f-1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株sgc-7901/ddp对顺铂的敏感性

目的探讨e2f转录因子1（e2ftranscriptionfactor1,e2f-1）基因沉默对人胃癌耐药细胞株sgc-7901/ddp对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将sgc-7901/ddp细胞接种于六孔板，分为3组：以e2f-1沉默重组慢病毒颗粒（lv-shrna-e2f-1）感染sgc-7901/ddp，作为lv-shrna-e2f-1组；以阴性对照慢病毒颗粒（lv-shrna-nc）感染sgc-7901/ddp，作为lv-shrna-nc组；空白对照组不做任何处理。以mtt法测定转染后各组细胞对ddp的半数抑制浓度（ic50），并以axnnexinv-pe/7-aad双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用westernblot和半定量rt-pcr技术分别对各组细胞中e2f-1、survivin、bcl-2的mrna及蛋白水平进行检测。结果与lv-shrna-nc组和空白对照组相比，lv-shrna-e2f-1组细胞对顺铂的ic50显著降低，细胞凋亡率显著提高，细胞周期阻滞于g0/g1期，差别均有统计学意义（p<0.05）；lv-shrna-e2f-1组e2f-1mrna水平较lv-shrna-nc组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%，蛋白水平分别下降66.7%和70.5%（均p<0.01）；lv-shrna-e2f-1组survivinmrna水平较lv-shrna-nc组和空白对照组分别下降30.3%和28.7%，蛋白水平分别下降56.5%和53.6%（均p<0.01）；lv-shrna-e2f-1组bcl-2mrna水平较lv-shrna-nc组和空白对照组分别下降76.6%和76.8%，蛋白水平分别下降74.6%和79.9%（均p<0.01）；lv-shrna-nc组与空白对照组比较，上述指标差别均无统计学意义（均p>0.05）。结论：沉默e2f-1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株sgc-7901/ddp对顺铂的敏感性，其机制可能与survivin及bcl-2表达下调有关，提示e2f-1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。