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南方医科大学学报 2013
camkiiγ通过上调nf-κb信号通路促进结直肠癌细胞的增殖Keywords: 钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶iiγ,结直肠癌,核转当因子κb,细胞增殖 Abstract: 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶iiγ(camkiiγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量rt-pcr法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中camkiiγmrna表达水平。用慢病毒载体plenti6.3-mcs-ires2-egfp制备慢病毒颗粒lenti-camkiiγ,转染sw620细胞,建立稳定表达camkiiγ结直肠癌细胞系sw620-camkiiγ。测定sw620-camkiiγ细胞的生长曲线及克隆形成能力。westernblotting检测sw620-camkiiγ细胞ikkα、ikkβ、ikkγ、p-ikkα/β、p-iκb和iκb表达水平。免疫荧光检测sw620-camkiiγ细胞nf-κbp65核浆及核内的表达情况。检测裸鼠移植瘤的瘤体积。结果camkiiγ在5种结直肠癌细胞系中的mrna水平均高,在20对组织中有18对癌组织mrna水平比癌旁组织高。慢病毒转染的camkiiγ过表达细胞系增殖能力增强(p<0.05)。camkiiγ能够激活细胞内的nf-κb信号通路,促进nf-κbp65进核。camkiiγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(p<0.05)。结论camkiiγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活nf-κb通路。
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