基于同源加尾系统的4种腹泻病毒的多重rt-pcr检测方法

目的针对轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒四种常见腹泻病毒，建立基于同源加尾（homo-tagassistednon-dimer,hand）系统的一步法四重rt-pcr检测方法。方法根据4种病毒基因组保守序列设计引物并在5’端加上同源尾巴序列。通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度等pcr参数构建四重rt-pcr反应体系，并系统评价其稳定性、特异性和灵敏度。结果成功建立基于hand系统的4种腹泻病毒一步法多重rt-pcr检测方法。特异性分析显示四种病毒间无交叉反应，灵敏度分析显示轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和扎如病毒的检测下限分别达到48、9.6、1.92和48pg。结论所建立的基于hand系统的4种腹泻病毒多重rt-pcr检测方法简便快速、灵敏特异稳定、成本低廉，非常适用于基层医学实验室。