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南方医科大学学报 2013
muc2基因表达对益生菌调节肠屏障作用的影响Keywords: muc2,shrna,益生菌,e.colik1(e44),粘附与侵袭 Abstract: 目的观察益生菌诱导的乳鼠结肠muc2基因的表达及其对益生菌抑制e.colik1株e44黏附侵袭肠屏障作用的影响。方法sd乳鼠分别用益生菌、e44株和益生菌+e44株三组灌胃7d后,rt-pcr法观察益生菌和e44株诱导结肠muc2基因的表达;靶向muc2基因的shrna真核质粒表达载体(shrnamuc2)和阴性对照shrnanc转染人结肠癌lovo细胞,荧光定量pcr法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测muc2基因对益生菌拮抗致病菌e44粘附侵袭的影响。结果灌胃益生菌组sd乳鼠肠道muc2基因明显上调,而e44组则显著降低。用shrnamuc2转染lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7%;益生菌对e44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,e44相对粘附率为56.64%,相对侵袭率为66.64%。结论益生菌诱导的muc2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一;muc2基因沉默后,益生菌对e44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低。
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