全部 标题 作者
关键词 摘要

OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元

查看量下载量

相关文章

更多...

荧光定量法测量平滑肌细胞内钙离子浓度的探讨

, PP. 450-452

Keywords: 激光扫描共聚焦显微术,荧光探针,细胞内钙离子浓度,动脉血管平滑肌

Full-Text   Cite this paper   Add to My Lib

Abstract:

目的研究平滑肌细胞内ca2+浓度的动力学变化,建立一种定量测量细胞内ca2+浓度的方法。方法分离肠系膜细动脉血管平滑肌(asmc)细胞,用荧光探针indo-1和激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞ca2+浓度的动力学变化;首先在37℃环境下标定ca2+探针indo-1的解离常数kd值,根据荧光-浓度换算公式将测量的荧光强度值换算成ca2+浓度值。结果激光扫描共聚焦显微成像技术测量的细胞荧光图像分析显示,平滑肌细胞[ca2+]i在地塞米松的刺激下显著上升,有时会出现自发钙波的现象,并且细胞内出现钙超载的现象(细胞荧光图像呈现白色)。通过测量得到的kd值结合荧光强度-浓度换算公式可准确地测量细胞内[ca2+]i。结论荧光定量法结合共聚焦显微成像技术可以简易、快捷地监测细胞内钙离子的动力学变化,不失为一种定量测量细胞内钙离子的方法。

References

[1]  huox,baoyy,huangh,etal.activationofchickenembryonicmacrophagesandchangeofintracellularfreeca2+level[j].actabiophyssin,1998,14(1):179-89.
[2]  scheenenwj,makingslr,grosslr,etal.photodegradationofindo-1anditseffectonapparentca2+concentrations[j].chembiol,1996,3(9):765-74.
[3]  kmanom,carrolldj,denujm,etal.calcium-mediatedinactivationofthemapkinasepathwayinseaurchineggsatfertilization[j].devbiol,2001,236(1):p244-57.
[4]  harrisonsm,bersdm.correctionofprotonandcaassociationconstantsofegtafortemperatureandionicstrength[j].amjphysiol,1989,256:c1250-6.
[5]  thomasd,toveysc,collinstj,etal.acomparisonoffluorescentca2+indicatorpropertiesandtheiruseinmeasuringelementaryandglobalca2+sigmals[j].cellcalcium,2000,28(4):213-23.
[6]  temelmn,chenw,persechinia,etal.differentialcodesforfreeca2+-calmodulinsignalsinnucleusandcytosol[j].currbiol,2000,10(2):86-94.
[7]  konishim,yamashitat,nakayamas,etal.calciumwavesinskinnedcardiacmyocytesevokedbytwo-photonexcitationphotolysisofcagedcalcium[j].jpnjphysiol,2001,51(1):127-32.
[8]  雷国华,鲍永耀,周俊岭,等.荧光定量测量方法在共聚焦显微镜上的应用[j].第一军医大学学报,1998,18(1):47-51.leigh,baoyy,zhoujl,etal.quantitativefluorescencemeasurementanditsapplicationonconfocalmicroscopy[j].jfirstmilmeduniv/diyijunyidaxuexuebao,1998,18(1):47-51.

Full-Text

Contact Us

service@oalib.com

QQ:3279437679

WhatsApp +8615387084133