成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向诱导分化的实验研究

目的研究体外培养的成人骨髓间充质干细胞(msc)在特定的条件下定向诱导分化为成骨细胞,探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性和应用价值。方法抽取健康成年志愿者骨髓,在含10%胎牛血清的高糖dmem培养基中采用全骨髓培养法,培养传代后改用含地塞米松(1×10-8mol/l)、β-甘油磷酸钠(10mmol/l)和维生素c(50mg/l)的条件培养基培养,在相差显微镜和电镜下观察细胞形态,免疫组化检测ⅰ型胶原,gomori钙钴法进行碱性磷酸酶(ap)染色、vonkossa法进行钙结节染色,同时测定细胞内ap(碱性磷酸酶)含量变化,并进行统计学分析。结果原代和传代培养的细胞具有活跃的增殖能力,诱导培养2~3周后,透射电镜下观察见大量扩张的粗面内质网、高尔基体和线粒体,细胞核较为幼稚。ⅰ型胶原染色、ap及钙结节染色等均为强阳性;ap活性明显增强(p<0.05)。结论msc取材安全方便,易于诱导分化为成骨细胞,有望成为理想的骨组织工程种子细胞来源,本实验方法可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法之一。