固定方式对神经细胞膜nmdar1免疫细胞化学定位的影响

目的探讨不同固定方式对神经细胞膜nmda受体nr1亚基免疫细胞化学定位结果的影响,并确定nr1在膜上的亚细胞定位分布。方法采用免疫细胞化学abc法观察不同固定方式分组时nr1亚基在神经元膜上的定位分布。结果-20℃纯甲醇和-20℃纯丙酮固定5min组呈现nr1典型的细胞膜阳性染色,定位在神经元两极靠近树突起始部及树突干上。4%多聚甲醛及加上0.5%戊二醛固定20min组呈现染色假阴性。95%乙醇固定10min组呈现细胞膜染色假阴性,细胞核染色假阳性。结论每种抗原免疫细胞化学检测中都有各自最适合的固定方法。nmdar1抗原需要应用缓和的固定方式,-20℃纯甲醇和-20℃纯丙酮5min短时间固定效果最好。nmdar1分布于神经元膜两端树突起始部及树突干上。