以抗体竞争结合抗原测定单抗亲和力常数的研究

目的在friguent方法基础上建立更加稳定可靠的基于抗原/抗体竞争结合原理的单抗亲和力常数(kd)检测方法。方法以抗体对抗原进行竞争结合,通过双抗体夹心法检测在一定抗体浓度竞争下抗原的结合率计算kd值。结果用改良方法在两次不同条件下检测抗il-8单抗的kd值分别为:2.61×10-12mol/l和2.39×10-12mol/l,而使用friguent方法在两次不同条件检测抗il-8单抗的kd值分别为:5.57×10-10mol/l和1.41×10-10mol/l。结论相对于friguent方法,本研究计算出的kd值更能反映抗原/抗体结合的真实情况,而且在不同实验条件下检测结果重现性强。?