新型taqman-mgb探针实时荧光定量pcr检测人类mdr1基因

目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量pcr检测新方法。方法用primerexpress2．0引物设计软件设计引物和mgb探针,以taqman-mgb探针技术为基础,运用taqman-mgb探针,以含有目的基因mdr1cdna的质粒phamdr1／a为阳性模板,建立实时荧光定量pcr检测方法。结果所建立方法的最低检测限度为15个基因拷贝／反应,在待扩增dna浓度为3．061×103cps／ml-3．061×109cps／ml范围时,模板浓度与循环阈值(ct)之间的相关性良好,决定系数r2为0．988243。结论应用taqman-mgb探针的实时荧光定量pcr方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确性高等优点。