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南方医科大学学报 2013
无血清培养cd133+colo205大肠癌细胞可高表达aldh1Keywords: 大肠癌,大肠癌干细胞,cd133,aldh1 Abstract: 目的通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-freemedium,sfm)培养的colo205细胞,研究其对cd133与aldh1表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对colo205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimentedmedium,ssm)组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物cd133表达的阳性率;流式分选sfm组cd133+细胞和cd133-细胞,倒置显微镜观察cd133+细胞和cd133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测cd133+细胞和cd133-细胞cd133和aldh1的表达;分别将cd133+细胞和cd133-细胞在nod/scid小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对肿瘤组织检测aldh1表达。结果sfm组cd133+细胞比例明显高于ssm组(p<0.05);cd133+细胞在sfm中可以形成肿瘤干细胞球,而cd133-则不能形成;cd133+细胞高表达cd133和aldh1,且两者共表达,而cd133-细胞则是阴性表达;cd133+细胞和cd133-细胞成瘤后,cd133+细胞组肿瘤组织aldh1阳性表达,而cd133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养基培养cd133+colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达aldh1,aldh1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。
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