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南方医科大学学报 2014
三种成体干细胞对脂多糖诱导raw264.7细胞炎症状态的影响Keywords: 羊膜上皮细胞,羊膜间充质细胞,脐带间充质细胞,m1型巨噬细胞,m2型巨噬细胞 Abstract: 目的比较人羊膜上皮细胞((humanamnioticepithelialcell,h-aec))、羊膜间充质细胞(humanamnioticmesenchymalcell,ha-msc)和脐带间充质细胞(umbilicalcordmesenchymalstemcells,uc-msc)分泌的细胞因子对脂多糖刺激巨噬细胞系raw264.7炎症状态的影响。方法将lps刺激的raw264.7细胞炎症模型作为对照组,比较h-aec、ha-msc、uc-msc和raw264.7共培养或条件培养基培养raw264.7对raw264.7炎症状态的影响。比较各组raw264.7细胞的迁移能力;检测各组细胞分泌一氧化氮(no)的水平;用实时定量多聚酶链反应(rt-pcr)检测各组细胞经典激活的巨噬细胞(classicallyactivatedmacrophage,m1macrophage)相关的促炎基因如白介素-1β(il-1β)、肿瘤坏死基因а(tnfа)、一氧化氮合成酶-2(nos-2)以及m2macrophage相关的抑炎基因如精氨酸酶(arg-1)、甘露糖受体基因cd206、b类清道夫受体cd36)表达情况。结果(1)h-aec、ha-msc、uc-msc处理后raw264.7的迁移率分别为14.7%±4.5%、9.6%±0.7%、13.0%±0.9%,与对照组(31.1%±11.0%)相比,3种细胞的条件培养基处理后raw264.7的迁移率均降低,差异具有显著性(p<0.05);(2)h-aec、ha-msc、uc-msc共培养后raw264.7细胞分泌no的水平分别为24.26±0.72、44.52±2.51、42.25±0.76μmol/l,与对照组(45.65±1.78μmol/l)相比,h-aec组细胞分泌的no有显著性下降(p<0.05);(3)促炎基因与抑炎基因的表达改变:(a)h-aec处理组促炎基因il-1β、tnfа、nos-2、infβ的表达下调,与对照组相比有显著差别;ha-msc、uc-msc处理组促炎基因infβ表达下调显著,其余基因均上调表达;抑炎相关基因如arg-1、cd206、cd36均上调;(b)3组细胞干预后抑炎症相关基因arg-1、cd206、cd36表达均上调,与对照组有显著差异。结论人羊膜上皮细胞、羊膜间充质细胞和脐带间充质细胞可以促进巨噬细胞向m2型分化,但其效果和机制存在不同。
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