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南方医科大学学报 2014
表皮葡萄球菌mscl基因突变株的构建及其生物学功能Keywords: 表皮葡萄球菌,同源重组,mscl基因,低渗胁迫,生物膜 Abstract: 目的初步探讨表皮葡萄球菌mscl基因的生物学功能。方法构建含有壮观霉素抗性基因(spc)的同源重组质粒pmad-δmscl,电转入表皮葡萄球菌1457,在42℃条件下振荡培养,利用蓝白斑和抗生素抗性筛选表皮葡萄球菌mscl基因敲除突变株(se1457-δmscl)。通过检测低渗胁迫前后突变株和野生株d600值及cfu的变化观察mscl基因对渗透压的调节作用。采用微量板半定量方法检测不同条件下mscl敲除突变对细菌生物膜形成的影响。结果成功构建同源重组质粒pmad-δmscl,经pcr扩增和测序验证获得了表皮葡萄球菌mscl基因敲除突变株,并通过rt-pcr在转录水平上得到进一步验证。处于对数生长期的mscl突变株在低渗胁迫下的生存能力显著降低,但其生物膜形成能力与野生株相比无显著差异。结论表皮葡萄球菌mscl基因可在对数生长期参与渗透压的调节,但对生物膜的形成无影响。
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