神经生长因子对不同胰腺癌细胞的刺激作用及其与细胞trk-a表达的关系

摘要：目的研究不同胰腺癌细胞株对神经生长因子（ngf）刺激的反应性，以及各细胞株中trk-a的表达情况，探讨ngf对胰腺癌细胞株作用的分子机制。方法选取mia-paca-2、panc-1、sw-1990、aspc-1、bxpc-3等5种不同转移性能及分化程度的胰腺癌细胞株，给予外源性ngf刺激，运用mtt方法观察各种细胞株的增殖情况；通过matrigel实验观察ngf对细胞侵袭性的影响。运用pcr及westernblotting检测各种细胞株中trk-a的表达情况，并观察ngf刺激作用与细胞trk-a表达之间的关系。结果用含有不同浓度ngf的培养液（0、4、20、100、500ng/ml）对5种细胞进行培养及mtt检测，发现ngf浓度为100ng/ml对细胞的刺激作用最强。选用含100ng/mlngf的培养液对各组胰腺癌细胞进行培养及mtt检测，结果显示ngf对panc-1细胞的刺激作用最大，增殖最快，对aspc-1的刺激作用最小。matrigel实验显示ngf可明显增加panc-1及mia-paca-2细胞的侵袭能力，对aspc-1细胞影响最小。trk-a抑制剂cep701可抑制ngf对细胞侵袭的刺激功能。对细胞中trk-a基因表达及蛋白水平检测显示，panc-1细胞trk-a水平最高，aspc-1细胞水平最低。细胞内trk-a表达水平与ngf对细胞增殖及侵袭的影响成正相关。结论外源性ngf促胰腺癌细胞增殖与侵袭作用和细胞中trk-a基因及蛋白表达水平一致，说明ngf对胰腺癌的作用机制可能是通过与trk-a蛋白结合而促进胰腺癌细胞的增殖及转移。