腺病毒介导的靶向核糖核酸酶抑制hbv复制的研究

目的观察linker介导的乙型肝炎靶向核糖核酸酶(hbv-trl)重组腺病毒载体(rad)对hbv复制的抑制作用。方法使用构建载体pcdna3.1(-)/trl、tr、trmut、乙型肝炎病毒核心蛋白(hbvc)、人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hedn),分别将各目的片段亚克隆入穿梭质粒pdc316,与辅助质粒用磷酸钙法共转染hek293细胞,分别产生载体rad/trl、rad/tr、rad/trmut、rad/hbvc、rad/hedn,其中rad/trl组为实验组,其余为对照组。感染hepg2.2.15细胞,应用rt-pcr、间接免疫荧光法检测trl的表达,放免法测定细胞上清中hbsag、hbeag的含量。结果成功获得了含trl、tr、hbvc、hedn等不同目的片段的rad,在hepg2.2.15细胞中得到有效表达,并且明显降低了细胞上清中hbsag、hbeag的含量。结论腺病毒载体介导的乙肝靶向核糖核酸酶具有明显的抑制hbv复制的作用。更多还原